PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。為了避免純化核酸和擴增產物逆向污染前一個區(qū)域。PCR實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域:試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)。那么PCR實驗室應該怎么設計建設呢?
一:PCR實驗室平面布局
PCR實驗室4個區(qū)域應該單獨存在,進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應混合物配制和擴增區(qū)→擴增產物分析。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
二: 實驗室空調通風系統(tǒng)設計及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
1、試劑貯存和準備區(qū),對于氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴格的要求。
2、標本制備區(qū),本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區(qū)內不必要的走動。
3、擴增反應混合物配制和擴增區(qū),本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區(qū)內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。
4、擴增產物分析區(qū),本區(qū)是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。
三:PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
四:PCR實驗室注意事項
1、幾個區(qū)域的大小設置情況,試劑準備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū),空間可以相對小一些,樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。
2、試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。
3、PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,可以根據(jù)用戶的使用情況和資金的投入選擇。
以上就是設計建設一個標準的PCR實驗室應考慮的方向,如果有更多實驗室裝修問題,可以關注我。
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